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２０１２年１０月 第ｌ４卷第１０期 中国现代中药Ｍｏｄｅｍ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ

二苯乙烯苷对ＳＡＭＰ８小鼠学习记忆

能力的改善作用△

刘玲 ，赖术 ，黎昀 ，黄忠仕

（１．广西中医药大学，广西 南宁 ５３０００１；２．右江民族医学院，广西 百色 ５３３０００）

［摘要］ 目的：探讨二苯乙烯苷（ＴＳＧ）对老年痴呆模型ＳＡＭＰ８鼠学别处的拼音 习记忆能力的影响。方法：６月龄ＳＡＭＰ８

鼠５０只，随机均分为ＳＡＭＰ８空白组，阳性药石杉碱甲对照组，高、中、低ＴＳＧ组；６月龄ＳＡＭＲ１鼠１Ｏ只为正常

对照组。各组分别灌胃相应药物４５ ｄ后，采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫方法，以逃避潜伏期、原平台象限停留时间等指标观察

其行为学改变。结果：ＳＡＭＲ１组和ＴＳＧ组在试验中逃避潜伏期明显短于ＳＡＭＰ８空白组（Ｐ＜０．０５）。平台象限的停

留时间和穿越原平台次数在探索试验中明显多于ＳＡＭＰ８空白组（Ｐ＜０．０５）。可视平台试验结果各组无差异。结论：

ＴＳＧ能提高ＳＡＭＰ８鼠的学习记忆能力。

［关键词］ 二苯乙烯苷；Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫；老年性痴呆；学习记忆能力；快速老化小白鼠

老年性痴呆（ＡＤ）是一种原因未明，以认知功

能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病。快

速老化模型小白鼠（Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｐｒｏｎｅ

ｍｏｕｓｅ／８，ＳＡＭＰ８）简称老化鼠，为一个较理想的衰

老模型。ＳＡＭＰ８可以很好地模拟老年痴呆，其机制

包括大脑皮层线粒体功能降低、海马胆碱能神经功

能下降以及氧化应激等 Ｊ。二苯乙烯苷（２，３，５，

４ 四羟基二苯乙烯 ２．Ｄ 一Ｄ．葡萄糖苷，ＴＳＧ）是何

首乌中特有的生物活性成分，现代中药药理研究发

现其具有较强的抗氧化、抗衰老、调节细胞凋亡等

作用［２－３］，ＴＳＧ能显著降低ＳＡＭＰ８鼠脑组织谷氨酸

（Ｇｌｕ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）含量，纠正ＳＡＭＰ８鼠脑区

氨基酸类递质代谢的紊乱状态，使兴奋性和抑制性

氨基酸神经递质最终趋向平衡 Ｊ。本研究通过观察

ＴＳＧ对ＳＡＭＰ８小鼠学习记忆能力的影响，探讨ＴＳＧ

对老年性痴呆的防治作用，为今后治疗、研究老年

性痴呆提供实验依据。

１材料

１．１动物

ＳＡＭＰ８和ＳＡＭＲ１（Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ－

ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｍｏｕｓｅ／１，正常老化小白鼠），雄性，体重

２４～２８ ｇ，清洁级，由天津中医药大学第一附属医

院提供（动物质量合格证号：Ｗ２－Ｊ津实动质Ｍ准字

第００６号）。

１．２药物

ＴＳＧ（桂林三宝药业有限公司），石杉碱甲（浙江

震元制药有限公司，批号：１１０２０３）。

１．３仪器

Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫（中国科学院药物研究所）。Ｍｏｒｒｉｓ

水迷宫由圆形水池、平台和记录系统３部分组成，

水池直径１００ ｃｍ，高５０ ｃｍ，内壁黑色，水温控制

在（２２１）℃。房间内光线柔和而均匀，平台位于

水池等分的４个象限中的任意１个象限，且没于水

下１ ｃｍ。实验期间迷宫外参照物保持不变。一摄像

头置于水池中央的上方约２ ｍ处，自动采集动物游

泳图像，图像自动采集和分析系统（中国医学科学院

药物研究所提供）自动分析和处理。

２方法

２．１动物分组与喂养

选择６月龄ＳＡＭＰ８雄性鼠５０只，随机分为

ＳＡＭＰ８对照组、石杉碱甲阳性药对照组、ＴＳＧ高剂

量组、ＴＳＧ中剂量组、ＴＳＧ低剂量组，每组１０只。

另外，选择６月龄ＳＡＭＲ１雄性鼠ｌ０只，作为

ＳＡＭＰ８的模型对照组。各组均按０．２ ｍＬ・（１０ｇ） 体

［基金项目］广西自然科学基金（桂科自０９９１２８１）

［通讯作者］黄忠仕，Ｔｅｌ：（０７７６）２８５１９５９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｚｓｌ００４＠１６３．ｔｏｍ

・ｌ２・

２０１２年１Ｏ月 第１４卷第１０期 中国现代中药Ｍｏｄｅｍ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｏｃｔ．２０１２ Ｖｏ１．１４ Ｎｏ．１０

重给药。ＳＡＭＰ８对照组、ＳＡＭＲ１对照组：０．９％氯

化钠溶液２０ ｍＬ・ｋｇ～；阳性药组：石杉碱甲０．０２

ｍｇ・ｋｇ～；ＴＳＧ低剂量组：ＴＳＧ ０．０３３ ｇ・ｋｇ～；ＴＳＧ

中剂量组：ＴＳＧ ０．１ ｇ・ｋｇ～；ＴＳＧ高剂量：ＴＳＧ ０．３

ｇ・ｋｇ～。以上各组每日灌胃给药１次，连续４５ ｄ。

喂养结束后采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫测试空间学习记忆能

力的改变。

２．２行为学测试

２．２．１隐蔽平台试验（ｈｉｄｄｅｎ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｔｒｉｍ） 每天在

固定时间将小鼠面向池壁分别从入水点放入水中，

记录其在１００ Ｓ内寻找到平台的时间（逃避潜伏期

ｅｓｃａｐｅ ｌａｔｅｎｃｙ），操作轻柔，避免不必要的应激刺

激。历时５ ｄ，每天３次，入池位置为平台对面象限

及所邻２个象限的池壁中点。本实验将最大潜伏期

设为１００ ８，如果小鼠在１００ Ｓ未找到平台，则由实

验者用手牵引其至平台上，停留３０ Ｓ，逃避潜伏期

记成１００ Ｓ。采用每天第１次的水迷宫训练数据作为

评价小鼠记忆力的指标 ｊ。为避免小鼠直接看见平

台，在水中加入碳素墨水，每３ ｄ换１次水。

２．２．２探索试验（ｐｒｏｂｅ ｔｒｉａ１） 隐蔽平台试验结束

２４ ｈ后，撤除平台，任选１个人水点将小鼠放入水

中，记录其１００ Ｓ游泳轨迹，计算其在原平台象限游

泳时间和穿越原平台次数。

２．２．３反向试验（ｒｅｖｅｒｓａｌ ｔｒｉａ１） 将平台位置移至对

面象限，其余操作同隐蔽平台试验，训练３ ｄ。

２．２．４可视平台试验（ｖｉｓｉｂｌｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｔｒｉａ１） 最后

１ ｄ，让平台位置露出水面１ ｃｍ，其余操作同隐蔽平

台试验。

２．３统计学处理

应用ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓｌ７．０软件进行数据处理，数

据以均数标准差表示，组间比较用单因素方差分

析（Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ，ＡＮＯＶＡ）检验，Ｐ＜０．０５

为有统计学意义。

３结果与分析

３．１隐蔽平台试验

隐蔽平台试验中的逃避潜伏期反映了动物空间

记忆的获得情况，即学习能力。试验第１天，采用

第１次小鼠入水游泳数据，受到水的刺激大多数小

鼠都绕着水池池壁游，数据没有统计学意义。通过

训练次数的增加，小鼠空间学习能力显著升高，并

通过空间学习建立起空间记忆…。从第２天起，

ＳＡＭＲ１组的逃避潜伏期就明显短于ＳＡＭＰ８组（Ｐ＜

０．０５），说明同一种系的正常老化小鼠学习记忆能力

比快速老化小鼠强。石杉碱甲组和ＴＳＧ组逃避潜伏

期也明显短于ＳＡＭＰ８组（Ｐ＜０．０５），表明用药后能

改善快速老化老鼠的学习记忆能力。ＴＳＧ组与阳性

药对照组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见

图１。

第１天 第２天 第３天 第４天 第５天

圃ＳＡＭＲ１一ＳＡＭＰ８口石杉碱甲一ＴＳＧ高一ＴＳＧ中一ＴＳＧ低

注：与ＳＡＭ温庭筠菩萨蛮赏析 Ｐ８空白对照组比较※Ｐ＜０．Ｏｌ，ＡＰ＜０．０５，下同。

图１不同组别隐蔽平台试验逃避潜伏期比较（ ｓ，ｎ＝１０）

３．２探索试验

探索试验是Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫中较为敏感而精确的

测试方法，测量前出塞九首其六翻译 动物的记忆保持能力。ＳＡＭＲ１组、

石杉碱甲组和ＴＳＧ组的停留原平台象限时间和穿越

原平台次数均明显多于ＳＡＭＰ８组（Ｐ＜０．０５），说明

正常老化小鼠和用药后各组的记忆能力比快速老化

小鼠强。见图２。

４０

暑３５

鹾３０气蒸云梦泽波撼岳阳城

鬈２５

躲

地ｌ０

Ｏ

圜

图２不同组别的小鼠探索试验的结果比较（ ４－ｓ， ＝１０）

３．３反向试验

反向试验主要反映动物的再学习能力，其实质

是动物习惯于原平台位置的脱抑制过程。试验发现

通过前面试验的训练，小鼠学习能力提高，反向试

验第１天ＳＡＭＲ１组逃避潜伏期就明显大于ＳＡＭＰ８

组（Ｐ＜０．０５）。由图３可见，ＳＡＭＰ８组、ＳＡＭＲ１组

和石杉碱甲组比较，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５

或０．０１），ＴＳＧ组分别与ＳＡＭＰ８组比较，差异具有

・１ ３・

∞ 加 ∞ 舳 ∞ 柏 加 ０

∞＼躁 龆

２０１２年１０月 第ｌ４卷第１０期 中国现代中药Ｍｏｄｅｍ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｏｃｔ．２０１２ Ｖｏ１．１４ Ｎｏ．１０

统计学意义（Ｐ＜０．０５或０．０１）。

３．４可视平台试验

试验发现ＳＡＭＲ１组、石杉碱甲组、ＴＳＧ组的逃

避潜伏期和ＳＡＭＰ８爆组词 组比较（Ｐ＞０．０５），差异无统计

学意义，即小鼠感觉、视觉或运动功能方面的差异

未对其空间学习记忆产生明显的影响。见图３。

圜ＳＡＭＲＩ●ＳＡＭＰ８口石杉碱甲一ＴＳＧ高●ＴＳＧｔ９一ＴＳＧ低

图３不同组别小鼠反向试验和可视平台试验

逃避潜伏期的结果比较（ ，ｎ＝１Ｏ）

４结论与讨论

何首乌为传统的补益中药，具有补肝肾，益精

血，延缓衰老之功效。ＴＳＧ是何首乌中的主要水溶

性成分，近年来发现其具有神经保护作用 Ｊ、降血

脂及抗动脉粥样硬化等作用，因此ＴＳＧ可能对ＡＤ

等神经退行性病变的防治具有很好的应用价值。

本实验采用经典的检测啮齿类动物学习记忆能

力的Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验，来观察药物ＴＳＧ作用于

ＳＡＭＰ８系小鼠后学习记忆的变化。让动物利用远侧

暗示从起始位置游到水下隐匿平台，通过重复训练

来评估空间学习能力。当水下平台被撤出时，通过

平台象限偏爱来确定动物的参考记忆＿９ 。。。实验发

现，隐蔽平台试验中ＳＡＭＲ１对照组、ＴＳＧ组和石杉

碱甲组逃避潜伏期均明显短于ＳＡＭＰ８对照组，撤出

平台后在原平台象限停留时间和穿越原平台次数也

大于该组。逃避潜伏期变短这说明小鼠的学习能力

通过训练不断地提高，撤出平台后在原平台象限停

留时间长和穿越原平台次数多则说明小鼠空间记忆

能力的提高。反向试验测试的是小鼠再学习的能力，

实验结果显示ＳＡＭＲ１组、ＴＳＧ组和石杉碱甲组逃避

・１４・

潜伏期明显短于ＳＡＭＰ８组，即表明ＳＡＭＲ１组、ＴＳＧ

组和石杉碱甲组小鼠再学习能力明显强于ＳＡＭＰ８

组，更进一步说明药物ＴＳＧ与阳性药石杉碱甲有类

似的提高小鼠空间记忆的能力，其作用机制有待进

一步试验证明。可视平台试验各组试验结果差异不

明显，则表明各组间感觉、视觉或运动能力无明显

差别。

通过对小鼠空间学习记忆的研究发现，ＴＳＧ对

快速老化小鼠学习记忆功能损害有明显的改善作用，

为ＴＳＧ的临床新用途提供了参考。

参考文献

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ｌ１７．１１９．

加 ∞ ∞ ∞ ∞ 加 ０

∞＼踩

２０１２年１０月 第ｌ４卷第１０期 中国现代中药Ｍｏｄｅｒｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ０ｃｔ．２０１２ Ｖ０１．１４ Ｎ０．１０

ＴＳＧ ｏｎ Ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ Ｍｅｍｏｒｙ Ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ＳＡＭＰ８ Ｍｏｕｓｅ

ＬＩＵ Ｌｉｎｇ ，ＬＡＩ Ｓｈｕ ，ＬＩ Ｙｕｎ ，ＨＵＡＮＧ Ｚｈｏｎｇ．ｓｈｉ

（１．Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＣｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００１，Ｃｈｉｎａ；

２．Ｙｏｕｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ ５３３０００，Ｃｈｉｎａ）

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＴＳＧ ｏｎ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ

ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ＳＡＭＰ８ ｍｏｕｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｆｉｆｔｙ ＳＡＭＰ８ ａｔ ｔｈｅ ａｇｅ ｏｆ ６ｔｈ ｍｏｎｔｈ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｉｎｔｏ ５ ｇｒｏｕｐｓ：ＳＡＭＰ８

ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｈｕｐｅｒｚｉｎｅ Ａ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗ－，ｍｉｄ—ａｎｄ ｈｉｇｈ—ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ＴＳＧ

，

ｗｉｔｈ １０ ｍｉｃｅ ｉｎ ｅａｃｈ

ｇｒｏｕｐ．Ａｎｏｔｈｅｒ ｔｅｎ ６ｔｈ ｍｏｎｔｈ ｏｌｄ ＳＡＭＲ１ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ａｓｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒ ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｆｏｒｔｙ－ｆｉｖｅ

ｄａｙｓ，Ｍｏｒｒｉｓ ｗａｔｅｒ ｍａｚｅ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ

．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＳＡＭＲ１

ｇｒｏｕｐ ｅｓｃａｐｅ ｌａｔｅｎｃｙ ｉｓ ｓｈｏｒｔｅｒ ｔｈａｎ ＳＡＭＰ８ ｇｒｏｕｐ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５），ｉｔ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ ＳＡＭＰ８ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗ ｏｂｖｉｏｕｓ

ｌｅａｒｎｉｎｇ ｍｅｍｏｒｙ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．ＴＳＧ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｓｗｉｍ ｉｎ ｏｒｉｇｉｎａｌ ｐｌａｔｆｏｒｍ

ｑｕａｄｒａｎｔ ｉｎ ｓｐａｔｉａｌ ｐｒｏｂｅ ｔｅｓｔ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｓｈｏｒｔｅｎｅｄ ｔｈｅ ｅｓｃａｐｅ ｌａｔｅｎｃｙ ｉｎ ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｑｕａｄｒａｎｔ

ｔｅｓ元宵节的相关诗句 ｔ ｔｈａｎ ＳＡＭＰ８ ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ｉｎ ｖｉｓｕａｌ ｐｌａｔｆｏｒｍ Ｔｅｓｔ

．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：

ＴＳＧ ｃｏｕｌｄ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ＳＡＭＰ８ ｍｉｃｅ

． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ２，３，５，４－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙｌ ｄｉｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌｅｎｅ一２—０．ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ（ＴＳＧ）；Ｍｏｒｒｉｓ ｗａｔｅｒ ｍａｚｅ；Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ

ｄｉｓｅａｓｅ；Ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ；Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ｍｏｕｓｅ ＳＡＭＰ８

首个贵细药材等级标准有望出台

（收稿日期２０１２－０４－２６）

； 近日，从上海市中药行业协会了解到，将对贵细药材逐步设等级标准规范价格。 ：

据悉，针对贵细药材制定的首个枫斗质量行业等级标准近日即将出台，将枫斗细分为５个规格、

１１个等级。业内人士透露，枫斗价格最高的与最低的可能相差１０倍，无标准的混水摸鱼现象很可能出 ｊ

现以次充好。

由于市场需求旺盛、自然资源稀缺，野山参、冬虫夏草、枫斗等名贵药材的价格近年来一路上扬， ：

ｊ经济利益驱使之下，以次充好、以假乱真、价格欺诈等现象屡见不鲜。 ｉ

ｊ “贵重药材产量稀少，在商家炒作下，消费者的购买行为几近盲目。”上海市中药行业协会会长许；

锦柏指出，中药材市场品种繁多，分类方法各不相同，甚至同一市场不同商家分类等级也不尽相同， ；

；从而造成中药材质量良莠不齐。“以枫斗为例，价格从两三千元一公斤到两三万元一公斤，为保证市民 ；

： 买到货真价实的中药材，相关等级标准的出台刻不容缓。” ；

据悉，中药行业协会将牵头对贵细药材制定行业等级标准。首个枫斗质量行业等级标准有望近日

出台，届时，根据枫斗质量好坏，或将分为５个规格、ｌ１个等级。

ｌ ： ｉ （信息来源：东方网） ；

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