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2023年4月7日发(作者:九年级英语周报答案)
Aseparatetechnologythatwehaveusedsuccessfullytomonitorspecific
protein-proteincomplexesinmembranemicrodomainsusingFCSisBimolecular
FluorescenceComplementation(BiFC)58,59whereattachmentoftheYFPorGFP
fragmenttoeachpartnerallowsspecificoligomericproteinpairingstobeide持之以恒的坚持的金句 ntifiedin
alivingcellbyitscomplementedfluorescence(torandaspecific
G-protein).
通过FCS,我们已经成功建立了另一个技术,即双分子荧光互补(BiFC)技术,来监
测特定的蛋白蛋白复合物58,59。在一个活细胞内,我们用黄色荧光蛋白(YFP)或者
绿色荧光蛋白(GFP)片段对配体或受体进行标记,通过它们的补充荧光对特定的寡聚
蛋白体进行识别(如一个受体和一个特定的G蛋白)。
Thepresenceandbehaviourofthereceptorsthemselvesin骆宾王在狱咏蝉赏析 identifiedmicrodomains
(ae)isanidealcomplementtotheScanningIonConductanceMicroscopy
method鹧鸪天范成大朗读 ologiesintheHardinglaboratory,wheretopographicalidentificationof
microdomainsallowspreciseagonistapplicationandsubsequentobservationof
signallingthroughFRET-basedreporters60-62.
在Harding实验室,我们能够获取微小区域(如膜小窝)中受体存在和活动的信息,这
对扫描离子电导显微镜方法是一个理想的补助,微小区域拓扑结构的识别使我们能够精
确的应用受体激动剂和东周列国志 通过FRET进行后续观察60-62。
5)Techniques点绛唇 素香丁香 tostudymultiple-ARsignallingpat元宵节祝福语 hwaysatthemolecularlevel
AFRET-basedassayforcyclicAMPhasalsobeendevelopedbasedonthecyclic
AMPbindingdomainofEpac(exchangeproteindirectl若即若离 yactivatedbycyclicAMP;[29]).
een
combinedwithScanningIonConductanceMicroscopytoprovidespatialinformation
onsignalactivationinadultcardiomyocytet-tubules37.
5)在分子水平上研究多种-AR信号通路的技术
用FRET试验检测cAMP也已经发展为以cAMP为基础检测其结合的Epac蛋白(直接
被cAMP激活的交换蛋白[29]),我们已经成功将其应用到心肌细胞37和HEK-2强词夺理是什么意思 93细胞
63中,把它与扫描离子电导显微镜相联合,我们就可以直观地看到在信号激活时成人心
肌细胞t-小管空间状况37。
Thisi关于冬天的四字成语 snowbeingextendedunderotherfundedworktolocalizesignalstocaveolae
(BHFNewHorizons)andtoprovidenewconstructssuchasp38MAPKFRET
reporters,orFRETreporterswithlocalizationsequencesforstructures(ae)
orsignalosomes(PKA-bindingAKAPs).
其他资金资助项目正在对这方面进行研究,包括探讨膜小窝的信号传递(BHF新的关
注点),以及提供新的构建体,如p38MAPK的FRET报告物,或确定局部结构(如膜
小窝)或信号复合体(蛋白激酶A结合激酶锚定蛋白)的有局部序列的FRET报告物
Reportergeneassayscontinuetobeagoodinitialscreenforbiasedsignaling
involvingthecAMPandMAPkinasepathways32,34andthesecanbeadaptedtosingle
cellmeasurementsbyusing-galactaseasthereportergeneandtheGeneBLAzer
FRET-baseddetectionmethodologyprovidedbyInvitrogen.
荧光素酶报告基因检测依旧能够很好地对cAMP和MAP激酶通路32,34这样的偏向信号
通路进行初筛,这同样适用于单细胞检测,它使用半乳糖酶为报告基因以及应用英杰
公司的GeneBLAzerFRET检测方法。
TheHilllaboratoryhasextensivelycharacterizedarangeof-blockersandagonistfor
theirbiasedagonismwhichcanbeusedtostudythehPSC-CMcontainingthese
reporters.
Hill实验室已经广泛地研究一系列阻滞剂和激动剂是否具有偏向激动的特效,这能够
用于研究包含AR信号通路的人多能干细胞-心肌细胞。
Thus,thecollectiveexpertiseoftheapplicantsinhiPSCproduction,cardiomyocyte
differentiationandanalysis,-ARsignaling,geneticmodification,pharmacologyand
translationtopreclinicalstudieswillbeusedtoaddressthefollowingObjectives.
那么,申请人在人多功能干细胞的制备、心肌细胞分化和分析、-AR信号、基因修饰、
药理学和基础研究转化为临床前研究这些方面所具备的经验将会被用于解决下面的目
标。
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