耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识

耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识本文简介：耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识耐万古霉素肠球菌感染防治专家委员会肠球菌广泛分布在自然界，常栖居人、动物的肠道和女性泌尿生殖系统，是人类的正常菌群之一。近年来，由于抗菌药物的广泛应用，使原本就对β一内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物具有内在抗药性的肠球菌耐药性进一步扩大，逐渐形成了多重耐药菌。在我国，耐万

耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识本文内容：

耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识

耐万古霉素肠球菌感染防治专家委员会

肠球菌广泛分布在自然界，常栖居人、动物的肠道和女性泌尿生殖系统，是人类的正常菌群之一。近年来，由于抗菌药物的广泛应用，使原本就对β一内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物具有内在抗药性的肠球菌耐药性进一步扩大，逐渐形成了多重耐药菌。在我国，耐万古霉素肠球菌(vancomycin

resistant

enterococci，VRE)感染的发生率呈逐年上升趋势，VRE已成为医院感染的重要病原菌之一[1，2]，它的产生对临床微生物学和流行病学提出了新的挑战。为了进一步规范并优化VRE感染患者的预防和治疗，《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》编辑部与《医学参考报·感染病学频道》编辑部组织国内部分专家，结合多年经验对相关资料进行整理分析，形成了《耐万古霉素肠球菌感染防治专家共识》(以下简称《共识》)。本《共识》依据的循证医学证据等级见表1。

一、相关概念

1.肠球菌(enteroeoccus)：肠球菌为革兰阳性球菌，多数菌种为短链状排列，一般无芽胞、尢荚膜，最适生长温度37℃，最适pH值4.7～7.6。在需氧革兰阳性球菌中，肠球菌是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌，可引起泌尿道感染、腹腔感染、盆腔炎和心内膜炎，严重时可导致脓毒症，病死率达21.0％～27.5％[3]。在分离的肠球菌菌种分布中，粪肠球菌占绝大多数，其次为屎肠球菌。

2.天然耐药(natural

resistance)：天然耐药又称固有性耐药，指细菌对某种抗菌药物具有天然的耐药性，通常由染色体基因决定，并会子代相传。肠球菌与其他临床上重要的革兰阳性菌相比，具有更强的天然耐药性，存在对头孢菌素类、部分氟喹诺酮类、氨基糖苷类等多种抗菌药物天然耐药。

3.获得性耐药(acquired

drug

resistance)：获得性耐药指细菌在接触抗菌药物后，改变代谢途径，使其自身具有抵抗抗菌药物而不被杀灭的能力，可由质粒将耐药基因转移到染色体，继而代代相传。肠球菌在大量广谱抗菌药物使用的前提下，出现了对β一内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、红霉素、氯霉素、利福平等药物的获得性耐药，其耐药机制各不相同。

4.耐万古霉素肠球菌：肠球菌在使用糖肽类抗菌药物(万古霉素)治疗过程中，其自身代谢和结构发生改变，使细菌对糖肽类(万古霉素)抗菌药物敏感性下降，甚至出现敏感性完全丧失，即为临床的VRE感染。

5.细菌定植：各种微生物(细菌)在人体中不同部位定居和不断生长、繁殖后代，但不产生临床症状，并不引起机体致病。这种现象通常称为“细菌定植”。定植的微生物必须依靠人体不断供给营养物质才能生长和繁殖，才能进而对人体产生影响(如导致感染)。

6.去污染(decontamination)：去污染是人为地将机体的正常菌群或已定植的细菌，部分或全部去除的一种防止感染措施，一般可分为全部去污染和选择性去污染两个类型。

(1)全部去污染

为了防止手术后感染，在术前常常先给患者施用各种强力的广谱抗菌药物，试图在“绝对无菌”条件下进行手术，以保证手术成功。(2)选择性去污染

选择性去污染就是采用窄谱抗菌药物，有针对性地去除某一类细菌。

二、耐万占霉素肠球菌的耐药机制

肠球菌在使用万古霉素治疗时，通过合成低亲和力的粘肽前体，使细菌的粘肽链末端成分发生改变，D-丙氨酰-D-乳酸(D-Ala-D-Lac)或D-丙氨酸-D-丝氨酸(D-Ala-D-Ser)代替了D-丙氨酸-D-丙氨酸(D-Ala-D-Ala)，改变了万古霉素的作用位点，消除了与万古霉素结合的靶位，导致VRE的产生。VRE可分为VanA、VanB、VanC、VanD、VanE、和VanG不同表型和基因型，不同分型决定了对万古霉素和替考拉宁的不同耐药性[4,5]，见表2。VRE耐药基因可以转移给金黄色葡萄球菌等其他阳性菌。

三、耐万古霉素肠球菌的流行现状及传播方式

1988年，英国首次报道了VRE的出现，短短十几年内，VRE先后在澳大利亚、比利时、加拿大、丹麦、德国、瑞士和美国均有报道[6,7]。从1989年至1993年，美国疾病预防控制中心报道院内感染VRE病例从0．3％

迅速上升至7.9％，而ICU的情况则从0.4％升至13.6％，1996年升至17.9％，2004年更是增加到31.3％[8]。在国内，2004年至2005年，我国大陆尚未报道VRE的发生，而2006年至2007年，通过卫生部全国细菌耐药监测网(Mohnarin)监测发现，粪肠球菌、屎肠球菌和其它肠球菌中分别有1.3％、3.2％和4.9％对万古霉素耐药，有1.6％、3.6％

和5.7％对替考拉宁耐药，高于对万古霉素的耐药率[9]。在最新公布的2008年中国CHINET细菌耐药性监测3207例肠球菌中，分离出VRE粪肠球菌6例(均为VanA型)，屎肠球菌43例(37例VanA型，6例VanB型)[10]。常见分离出VRE的部位包括尿、伤口、血、导管等。

VRE可通过患者之间传播，也可通过医护人员将耐药菌传给其他患者，污染的环境、医疗器械、各种用具均可传播VRE[11]。

四、VRE感染发生相关的危险因素

目前常见的VRE感染发生相关的危险因素包括[12,13]：

1.严重疾病，长期住ICU病房的患者；

2.严重免疫抑制，如肿瘤患者；

3.外科胸腹腔大手术后的患者；

4.侵袭性操作，留置中心静脉导管的患者；

5.长期住院患者、有VRE定植的患者；

6.接受广谱抗菌药物治疗，曾口服、静脉接受万古霉素治疗的患者。

五、实验室检查

耐万古霉素肠球菌实验室检测方法主要有纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂筛选法和分子生物学等方法。纸片扩散法在检测VanC型肠球菌时容易漏检，分子生物学方法如PCR方法具有快速、灵敏度较高等特点。

(一)细菌药敏方法[14]

1.琼脂筛选法：制备含万古霉素6

μg／ml的脑心浸液培养基(BHI)。将待测菌株制成浊度为0.5麦氏管的菌悬液，取菌悬液1～10μl点种在琼脂平板上，(35±2)℃(空气)培养过夜，24

h后观察结果，接种点>1个菌落生长，则推测万古霉素耐药。琼脂筛选法能准确检测全部VRE

型，在VanC1／C2型检测中可以明显减低错误率，且价格便宜，因此琼脂筛选法是临床常规筛选VRE最简便可靠的方法。美国临床实验室标准化协会(Clinical

and

Laboratory

Standards

Institute，CLSI)M100-S19推荐琼脂稀释法作为万古霉素耐药的筛选试验方法。

2.纸片扩散法：将浓度为30μg／ml的万古霉素药敏纸片贴在已接种测试菌的水解酪蛋白(Mueller

Hinton，MH)琼脂平板上。接种物的准备可采用生长法或直接菌落悬液法。使用0.5麦氏比浊标准的菌液在15

min内接种完毕。(35±2)℃(空气)培养24

h，在透射光下测量琼脂平板上的抑菌环直径，抑菌环内任何可辨别的细菌生长提示万古霉素耐药。结果判定如下：(1)抑菌环直径≤

14mm为耐药(R)；(2)抑菌环直径在(15～16)mm

之问为中介(I)；(3)抑菌环直径≥

17

mm为敏感(s)。

3.肉汤筛选法：用调节好含阳离子的MH肉汤(CAMHB)将浓度为30

μg／ml的万古霉素作梯度浓度的稀释，将待测菌株制成浊度为0.5麦氏管的菌悬液，分别接种于稀释好的肉汤管中，(35±2)℃(空气)培养24

h，以万古霉素能抑制细菌生长管的最低浓度为其MIC值。结果判定如下：(1)MIC≥32μg／ml为耐药；(2)MIC在(8～16)

μg／ml之间为中介；(3)MIC≤

4μg／ml为敏感。

4.自动化药敏检测法：目前有Vitek系统、ATB系统、MicroScan系统、Sensiter

ARIS等系统可进行自动化的药敏检测。将菌液稀释后注入药敏板或孔内，然后通过检测菌液浊度、荧光指示剂的荧光强度或荧光底物的水解反应来判读MIC结果。

(二)分子生物学方法[15]

用于VRE耐药基因检测的分子生物学方法有探针杂交、聚合酶链反应(PCR)等方法。与传统培养法相比，其敏感性和特异性分别为97.9％和100％。采用多重PCR方法可检测肠球菌4种耐药基因(VanA、VanB、VanC1和VanC2)。

该方法可在4

h内完成，有利于及时发出报告。其它耐药基因检测技术还有PCR-RFLP分析、PCR-SSCP分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA测序等。有条件的实验室可结合细菌药敏法及分子生物学等方法，进一步提高万古霉素耐药肠球菌的检出牢。

六、VRE感染的治疗

本共识所推荐的治疗方法和剂量完全建立在成人和肝肾功能正常的患者。

耐万古霉素肠球菌可在肠道内定植，严重的耐万古霉索肠球菌(VRE)感染通常发生在抵抗力低下的患者，且常常有严重基础疾病，其有效的抗菌药物治疗显得尤为重要。通过检测细菌对抗菌药物(如氨苄西林、庆大霉素、万古霉素、红霉素、氯霉素、利福平、多西环素、米诺环素和喹诺酮类、利耐唑胺等)的敏感度，确定使用何种药物治疗。同时可使用抗菌机理不同的抗生联合使用，增加药物的敏感性，见表3。

对VRE感染的患者，总的抗菌药物使用原则是：检测细菌对所有可能获得的抗菌药物的敏感度，根据药敏结果选择敏感的抗菌药物予以治疗。对于不同部化感染VRE，综合抗菌药物敏感性及抗菌药物在该组织的聚集浓度，决定使用何种抗菌药物。具体方案可参考如下。

(一)腹腔感染

对于腹腔感染的患者，其病情相对较重或者是在大手术(肝脏移植、肾脏移植)之后,及时有效地抗菌药物治疗，往往是决定患者预后的关键因素。因此，我们必须尽可能根据药敏试验结果选用抗菌药物。建议治疗方案如下：

1.对万古霉素和替考拉宁均耐药(VanA基因型)：

(1)若菌株对青霉素类敏感：大剂量氨苄西林／他唑巴坦(8～12

g／d，间隔4-6

h)[Ⅱ-3]；(2)氨苄西林/舒巴坦

3

次，间隔6

h＋链霉素(0.5～1)g／次，间隔12

h，或庆大霉素(1～1.7)mg／(kg·d)，每8小时1次(1I-2)；(3)利耐唑胺600mg，1次／日或间隔12

h(Ⅱ-1)。(4)替加环素(Tigecycline)首剂100

mg，其后50

mg，间隔12

h(Ⅱ-2)[16]。

2.对万古霉素耐药而对替考拉宁敏感或部分敏感(VanB基因型)：(1)替考拉宁0.4

g／d，给药2次／d(Ⅱ-1)；

(2)联合用药：替考拉宁0.4

g／d＋庆大穰素(1～1.7)mg／kg(Ⅱ-2)；替考拉宁0.4

g／d＋环丙沙星(或其他喹诺酮类抗菌药物)每次(200～400)mg间隔12

h(Ⅱ-2)；(3)利耐唑胺每次600

mg，1次／d或间隔12

h(Ⅱ-1)。(4)替加环素，首剂100

mg，其后50

mg，间隔12

h(Ⅱ-2)。

对于***的患者，出现VRE腹腔感染时，在使用抗VRE抗菌药物治疗的同时，往往建议使用抗真菌药物(氟康唑400

mg／d)预防真菌(Ⅱ-2)。

在使用抗菌药物治疗时，具体停药日期尚无明确循证医学报道，建议根据细菌学转阴情况决定不同患者疗程。

(二)泌尿系VRE感染

有研究表明，由于氨苄西林在尿道组织呈高浓度，因而对于VRE所致尿路感染可单独用氨苄青霉素治疗，亦可使用药物联合治疗。

1.氨苄西林／他唑巴坦3g／次，间隔6

h(Ⅱ-1)。

2.氨苄两林／他唑巴坦3g/次，间隔6

h

＋庆大霉素(1～1.7)mg／kg(II-1)。

3.对替考拉宁敏感可考虑替考拉宁0.4

g／d

＋庆大霉素／环丙沙星(Ⅱ-1)。

4.利耐唑胺600

mg，1次／d或间隔12

h(1I-1)。

5.呋哺妥因100

mg，间隔8

h，磷霉素(2~4)g／d，疗程2～4周(1I-1)(只用于泌尿系感染)。

在泌尿系抗感染治疗中，应根据具体感染部位而决定抗感染疗程，建议根据细菌学(尿培养)结果决定治疗时间。

(三)菌血症和心内膜炎

日前无可靠的有效治疗，在周外推荐使用奎奴普丁-达福普丁或利耐唑胺治疗，替考拉宁对部分(VanB)菌种有效。目前国内推荐的治疗总原则是根据药敏结果选用敏感抗菌药物、及时、足量、足疗程。

1.替考拉宁400

mg，间隔12

h，联合庆大霉素(1~1.5)mg／kg间隔8

h，疗程4~6周(Ⅱ-2)。

在这个联合治疗方案中，庆大霉素起协同作用，因此应将其控制在低血浆浓度，以防止所带来的不良反应(峰浓度不超过4μg/m1)(Ⅱ-1)。

2.利耐唑胺600

mg，间隔12

h，疗程原则上小于4周(1I-1)。

3.达托霉素6

mg／(kg·d)(II-2)。

4.奎奴普丁／达福普丁7.5

ms／kg，经中心静脉导管(Ⅱ-2)。

5.新纳西7.5

mg／kg，间隔8

h，经中心静脉导管。在留有深静脉导管的患者，肠球菌往往容易在导管尖端定植，而出现导管相关性感染或导管相关性脓毒症。因此，对于此类患者在考虑抗菌药物治疗的同时，必须首先考虑尽早拔除导管，消除感染源(Ⅱ-1)。虽有报道使用多西环素及氯霉素治疗可取得一定的疗效(有效率57％～61％)，但往往因患者伴有其他多脏器功能的损伤，单一用药治疗效果欠佳。建议尽量避免单一用药，自疗程初期即使用不同抗菌药物联合治疗；如替考拉宁与庆大霉素联用具有明显的协同作用[17]。

6.替考拉宁

＋庆大霉素／环丙沙星(Ⅱ-2)。

7.利耐唑胺600

mg，1次／d或间隔12

h(1I-1)。

8.达托霉素6

mg／(kg·d)(Ⅱ-2)。

9.奎奴普丁／达福普丁7．5

mg／kg，经中心静脉导管(Ⅱ-2)

(四)医院获得性肺炎的治疗

对于肺部感染的患者，痰培养见到VRE，是否予以抗感染治疗，目前意见尚未统一。部分专家认为VRE在呼吸系统中仅仅为定植，而并非真正意义的感染。因此，在培养出这些细菌时，我们要综合考虑细菌的致病力和宿主的免疫状态。当患者的临床症状体征不支持感染时，应不考虑选用或立即停用不必要的广谱抗菌药物。如确切考虑VRE与致病有关，可考虑予以利耐唑胺(VanA型)和替考拉宁(VanB型)治疗。

(五)VRE定植患者的干预

研究表明VRE对临床最常见的影响就是肠道内的VRE定植，这种定植不引起临床症状，但可持续存在相当长的时期，并可成为VRE传播给其他患者的储菌库[18]。某些VRE定植的患者存在发生VRE感染的危险，包括血液病患者、肿瘤患者、ICU患者、实体器官(尤其是腹部器官)移植受体。

VRE的定植在VRE的感染和传播的过程中发挥着非常重要的作用[19]。因此我们建议：定期对医护人员，尤其是重点工作部门(ICU、麻醉科、外科)工作人员进行VRE定植的筛查；对于外科医生如确定VRE定植，建议暂停其手术，避免手术污染；定期对医院长期住院患者进行VRE定植的筛查；制定本院VRE定植动态监测体系，观察变化趋势。

七、VRE感染报告、感染控制及预防对策

VRE定植于肠道通常不引起感染症状(腹泻)，但如果患者存在着高危因素，VRE可感染患者并引起临床症状。因此，在医疗机构中筛查VRE是必要的(Ⅱ-2)。如确诊为VRE感染，需立即启动相关报告流程及措施。

(一)VRE感染的报告

及时电话报告院感部门，启动院感紧急应急程序，并及时上报医院管理部门。

(二)VRE感染控制措施

1.将感染或带定植菌的患者隔离于单间、隔离单位或将同类患者隔离于较大的病房；

2.告知工作人员和患者有关注意事项，减少工作人员与患者在病房内的传播，患者医疗护理物品专用；

3.工作人员接触感染或定植患者后要加强洗手，严格按照标准六步洗手法进行认真洗手，配合速干手消毒剂消毒；

4.每天严格用含有效氯1000

mg／L的消毒剂擦拭物体表面：

5.医疗护理患者时要穿隔离衣，戴一次性手套、帽子、口罩等防护措施；

6.VRE感染患者产生的医疗废物应装入双层黄色塑料袋有效封口，袋外加注特殊感染警示标示，与医疗废物暂存处专职人员专项交接；

7.携带VRE的手术医生不得进行手术，直至检测转为阴性。

(三)对于VRE感染的预防

医院各相关部门必须制定一个检测、预防、控制VRE感染和暴发流行的详细计划，计划应包括以下几个方面：

1.合理掌握万古霉素使用适应证：在医院内应用万古霉素已确证是VRE产生和引起暴发流行的危险因素。因此，所有医院包括从未使用过万古霉素的医院和其它医疗机构，都应制订一个全面的抗菌药物使用计划。严格掌握万古霉素和相关糖肽类抗菌药物使用的适应证(Ⅱ-2)。

2.对每一位医护人员进行VRE相关知识培训：医院应有一个针对全体医务人员(包括进修生、学生、实验室人员，药师等)的继续教育计划，内容应包含VRE感染流行的有关概念、VRE感染对患者费用、疗效的潜在影响。由于VRE感染的发现和控制都需要所有医务人员高度警惕和高标准的操作方法，因此相应的专业知识和培训是必要的(Ⅱ-2)。

3.提高临床微生物室在检测、报告和控制VRE感染中的作用：临床微生物检验室是预防VRE感染在医院流行的第一道防线，即时、准确地鉴定和测定肠球菌对万古霉素耐药的能力，对诊断VRE定植和感染、避免问题复杂化都有极其重要的作用(Ⅱ-1)。因此，我们必须做好VRE实验室检测工作。

4.当VRE的定植或感染只发生在一个病房的某个患者时，要将VRE从医院彻底根除是很容易实现的，但如果VRE感染已在一个病房发展成局部性流行或已扩散到了其它病房或社会时，要根除它就变得困难且费用又高。因此必须尽最大努力减少以至消除VRE在患者之间的传播(I)。

耐万古霉素肠球菌已成为医院感染的重要病原菌，该菌的传播流行给医院感染的控制和预防带来极大困难。我国对万古霉素的临床应用并非十分广泛，但也出现了耐药菌株。因此必须严格控制万古霉素应用的适应证，以延缓耐药性的产生，积极研究和开发新的抗VRE的药物，应对医护人员等进行VRE感染流行的宣传教育及采取感染控制措施。

实验室也应做到快速分离和鉴定VRE，特别是要建立准确、快速、容易推广和普及的检测方法，以阻止VRE感染的传播和扩散，避免VRE感染引起严重的院内感染和多重耐药菌株的产生。

专家委员会(按拼音顺序)：陈宝敏、陈志海、成军、黄东生、李兴旺、李旭、林佳佳、刘景院、刘晓清、卢洪洲、卢联合、倪语星、宁琴、曲芬、沈叙庄、斯崇文、谭德明、唐云、王辉、王宇、于岩岩、肖永红、徐英春、杨道峰、俞云松、赵辉、赵红心、赵敏、郑波、朱德妹

志谢：非常感谢王宇教授在共识相关资料搜集、整理及起草过程中所作出的贡献。

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(收稿13期：2010-05-06)

(本文编辑：孙荣华)

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